ELISA实验操作要点:ELISA实验总是遇到这些问题,怎么办呀?

 

 

 

可能原因 解决方法
  洗板不充分   将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保洗涤充分
  确保在洗涤前弃掉了所有残留抗体溶液
  样品或标准品中含干扰物   设置空白对照
  缓冲液受污染   重新配制缓冲液

 

 

 

可能原因 解决方法
  试剂添加顺序错误或试剂配制有误   重复实验
  检查试剂配制方法
  复核试验试剂添加流程
  HRP被叠氮化合物污染   使用新鲜配制的试剂
  抗体用量不足   使用推荐的抗体量

 

 

 

可能原因 解决方法
  洗板不充分或跳过洗板步骤未去除残留的非结合过氧化物酶   严格按照说明书洗涤流程操作
  封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染   每步均需使用新的封板膜或试剂储液槽
  缓冲液有金属或HRP污染   配制新鲜缓冲液

 

 

 

可能原因 解决方法
  实验操作流程有误   严格按照说明书操作流程
  标准曲线稀释计算错误   重新计算制作新的标准曲线

 

 

 

可能原因 解决方法
  洗板不充分   将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保洗涤充分
  重复使用封板胶纸   每步均需更换使用新的封板胶纸
  未使用封板胶纸   需使用封板胶纸

 

 

 

可能原因 解决方法
  洗板不充分   将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保洗涤充分
  确保已在洗涤前弃掉所有残留溶液
  孵育温度发生变化   严格按照推荐的温度孵育
  勿在环境温度变化大的地方孵育
  操作流程改变   严格按照相同的操作流程
  封板胶纸重复使用导致HRP残留污染   每一步均使用新的封板胶纸

 

 

 

可能原因 解决方法
  样品中无检测物或表达量极低   设置阳性对照
  重复实验

 

 

 

可能原因 解决方法
  酶标仪波长设置不正确   检查酶标仪参数设置
  包被的酶标板超过使用效期   更换新批次试剂盒

 

 

 

可能原因 解决方法
  孵育温度不均衡   孵育时使用封板胶纸
  勿在环境温度变化大的地方孵育

 

 

 

可能原因 解决方法
  酶标板未处于正确温度下   确保使用前酶标板和试剂处于室温下
  溶液污染   避免使用含NaN3的试剂

 

 

 

|   ELISA操作前必读 / 下载

 

操作视频    样本处理    血液样本    加样

 

温育    拟合曲线    常见问题    下载

 

 

 

;